贝博®BBcellProbe® 细胞膜染色试剂DiI（BB-441916）是一款具有549nm激发波长和565nm发射波长的橙色荧光标记细胞膜探针。该试剂通过与细胞膜中的脂质分子结合，对细胞进行染色，非常适合用于监测细胞运动和细胞定位分析。

DiI具备优异的染料维持性，能够发出强而稳定的橙红色荧光（Ex/Em=549/565nm），并且与绿色荧光染料及蛋白质具有良好的荧光分辨率，因此非常适合用于多重指标的染色实验。

在最佳浓度下，亲脂性的荧光探针DiI能迅速扩散于细胞膜，确保整个细胞膜被均匀染色。在细胞膜染色之前，染色液的荧光强度较弱，但一旦与细胞膜结合，荧光强度则显著增强，激发后可发出橙色荧光，并呈现较高的淬灭常数和激发态寿命。

此外，荧光探针DiI通常对细胞活力并无显著影响，因此广泛应用于活细胞和固定细胞的示踪研究，尤其是在神经细胞及组织间的示踪和长期标记（long-term tracer）方面表现出色。除了用于标准的细胞膜荧光标记外，DiI还可用于检测细胞的融合和粘附，分析细胞在发育或移植过程中的迁移情况。通过荧光恢复后光漂白（FRAP）技术，可有效监测脂质在细胞膜上的扩散，并用于评估细胞毒性和标记脂蛋白等。

在实验过程中，该染料在推荐工作浓度下未表现出细胞毒性，不会影响细胞的活力和增殖能力。

检测方式包括激光共聚焦、荧光显微镜和流式细胞仪，适用于悬浮细胞和贴壁细胞的样本类型。

为制备染色工作液，根据样本数量将DiI探针以500-2500倍的比例稀释于HBSS或相应的无血清培养基中。对于悬浮细胞，首先用PBS洗涤两次，然后加入适量染色工作液重悬细胞。接着，在37℃环境下进行孵育，初始孵育时间可设为20分钟，后续需根据具体细胞类型优化时间，以实现均一标记。在孵育结束后，离心5分钟，弃去上清液，再加入37℃预热的培养基重悬细胞，并重复上述洗涤步骤至少两次。

对于贴壁细胞，同样需用PBS洗涤两次，随后在细胞培养板或爬片上加入适量染色工作液。在37℃下进行孵育，时间根据细胞类型进行调整。吸干染色工作液后，用预热的培养基洗净培养板或盖玻片，并最终利用荧光显微镜或流式细胞仪进行检测，激发波长为549nm，最大发射波长为565nm。

人生就是博-尊龙凯时，希望通过这一高性能的染色试剂，能够为您的生物医疗研究提供有力的支持与帮助。