多克隆抗体（polyclonal antibody, pAb）是通过对含有多种抗原表位的抗原免疫动物来产生的。这种方法可以激活多个B细胞克隆，从而产生针对多种抗原表位的不同抗体。最终获得的免疫血清是多种抗体的混合物，即多克隆抗体。相比之下，单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高纯度抗体，仅针对某一特定抗原表位。单克隆抗体的制备通常采用杂交瘤技术，该技术是将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞与具有无限增殖能力的骨髓瘤细胞融合后形成的B细胞杂交瘤。

一、单抗与多抗的优缺点

一、多克隆抗体的优点

1. 多克隆抗体能够放大低表达水平的靶蛋白信号；

2. 能够识别多个抗原表位；

3. 较单克隆抗体更能容忍抗原中的细微变化；

4. 识别与免疫原蛋白质具有高同源性的蛋白；

5. 是检测变性蛋白质的首选；

6. 多表位提供更为有力的检测效果。

二、多克隆抗体的缺点

1. 易产生批次间差异；

2. 可能产生大量非特异性抗体，在某些应用中造成背景信号；

3. 不适用于探测抗原的特定结构域，因为抗血清通常能识别多个结构域。

三、单克隆抗体的优点

1. 杂交瘤一旦制得，成为恒定的再生源，所有批次均相同；

2. 切片和细胞染色造成的背景较低；

3. 具有高度特异性，适用于分析测定中的一抗或检测组织中的抗原；

4. 高同质性；

5. 单克隆抗体的特异性可有效与混合物中的抗原结合。

四、单克隆抗体的缺点

1. 尽管可产生大量特异性抗体，但特异性可能过强；

2. 抗原经过化学处理后，比多克隆抗体更易于丢失表位，可以通过使用多种单克隆抗体进行补偿。

二、抗体的选择

当对抗体的特异性要求较高、用量较大或需要长期一致性时，推荐选择单克隆抗体。多克隆抗体的特异性较差，批次之间可能存在显著差异，因此在进行免疫检测时容易产生背景信号，例如在WB实验中出现杂带或在IHC实验中出现深背景。尽管存在交叉反应的问题，由于多克隆抗体能够识别多个抗原表位，因此实验结果通常不易受到少数表位破坏或构象改变的影响。此外，如果免疫原制备困难，则优选单克隆抗体。如果对抗体的特异性要求不高，且进行沉淀和凝集反应的检测性实验或仅需ELISA检测，则可选择多克隆抗体。

与单克隆抗体相比，多克隆抗体在制备时间短和首次制备成本低方面具有优势。在某些情况下，多克隆抗体也可以提高检测灵敏度，特别是对于丰度较低的蛋白质。

三、抗原的选择

抗原的选择可以基于天然蛋白、重组可溶蛋白、重组变性蛋白和多肽。抗原的质量越高，最终获得高质量抗体的几率也越大。目前的抗体制备常采用重组蛋白或多肽作为抗原。

通常情况下，重组蛋白作为抗原往往包含更多的抗原决定簇，既包含空间表位，也有线性序列表位，这样可以充分刺激机体的免疫系统，提高获取广泛应用抗体的机会，尤其对于已有修饰或复杂结构的目的蛋白，重组蛋白是优先选择。当然，在某些情况下，比如制备同源性极高的家族成员蛋白的抗体，可能需要找到特异性氨基酸合成多肽，或针对特定修饰进行多肽合成。

抗原多肽的选择通常遵循以下基本原则：
1. 尽量选择在蛋白表面的序列；
2. 确保该序列不形成α-螺旋；
3. N端和C端的肽段通常优于中间肽段；
4. 避免重复或相似序列；
5. 避免同源性太强的肽段；
6. 交联最好在对产生抗体重要性较低的末端进行；
7. 序列中尽量避免过多的脯氨酸，适量的脯氨酸有助于肽链结构的稳定性，有利于特异性抗体的产生。

总之，选择合适的抗体和抗原对于生物医学研究至关重要，而人生就是博-尊龙凯时努力为这一过程提供高质量的支持。