人可溶性白细胞分化抗原86(B7-2/sCD86)Elisa试剂盒仅供科研用途,严禁用于医学诊断检测。本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)原理。试剂盒操作步骤如下:
首先,将样本、标准品和HRP标记的检测抗体依次加入预先包被adropin(AD)抗体的微孔中。经过温育和彻底洗涤后,使用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下,会转化成蓝色,在酸性环境下再转化为最终的黄色,颜色深浅与样品中adropin(AD)含量呈正相关。最后,使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),以计算样品浓度。
试剂盒组成如下:
试剂盒组成
名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注
微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无
标准品 | 03mL*6管 | 03mL*6管 | 无
样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无
检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无
20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释
底物A | 6mL | 3mL | 无
底物B | 6mL | 3mL | 无
终止液 | 6mL | 3mL | 无
封板膜 | 2张 | 2张 | 无
说明书 | 1份 | 1份 | 无
自封袋 | 1个 | 1个 | 无
注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、25、50、100、200、400pg/mL。试剂盒需在2-8℃保存,有效期为6个月。
样品收集、处理及保存
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清与红细胞迅速分离。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝,3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织按适量生理盐水捣碎,3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如未及时检测样本,请按一次用量分装,冻存于-20℃以避免反复冻融,解冻时确保样品充分均匀。
自备物品
1. 酶标仪(450nm)
2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
操作注意事项
1. 从冷藏环境取出的试剂盒应在室温下平衡15-30分钟后使用。未用完的酶标板应装入密封袋中保存。
2. 洗涤液若有结晶析出,可在水中加热帮助溶解,但不会影响结果。
3. 加样时需使用加样器,并定期校对准确性,以避免误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,样本数量多可使用排枪加样。
4. 每次测定请进行标准曲线,并确保做复孔。如样本OD值大于标准品第一孔的OD值,请先稀释样品后再测定,并按照稀释倍数进行计算。
5. 封板膜仅限一次性使用,避免交叉污染。
6. 操作应严格按照说明书进行,结果判定以酶标仪读数为准。
7. 底物需避光保存。
8. 所有样品、洗涤液及废弃物需按传染物处理。
9. 不同批号的组分不得混用。
温馨提示:本公司提供代测服务,凡购买人生就是博-尊龙凯时的Elisa试剂盒均可享受免费的Elisa代测服务。详情请咨询销售经理或在线客服。