本试剂盒仅限于科学研究用途,严禁用于医学诊断。人黏膜素细胞黏附分子 (MAdCAM-1) Elisa试剂盒基于双抗体一步夹心法(ELISA)进行检测。
检测原理
本试剂盒采用了一种独特的双抗体一步夹心法。首先,将预先包被了adropin(AD)抗体的微孔板中依次加入样本、标准品以及HRP标记的检测抗体,经过温育和彻底洗涤后,使用底物TMB进行显色反应。TMB在过氧化物酶的催化作用下变为蓝色,在酸的影响下则最终转化为黄色。颜色的深浅与样本中的adropin(AD)含量呈正相关。最后,使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),从而计算出样品浓度。
样品收集、处理与保存方法
1. 血清: 应使用不含热原及内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后以3000转离心10分钟迅速分离血清与红细胞。
2. 血浆: 使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝血。3000转离心30分钟,取上清。
3. 细胞上清液: 3000转离心10分钟,以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆: 将所需组织加入生理盐水中捣碎,3000转离心10分钟,取上清液。
5. 保存: 若未即时检测样本,请将其按一次用量分装并冻存于-20℃,避免反复冻融,解冻时确保样品均匀充分解冻。
操作注意事项
本试剂盒的组成说明如下:标准品(S0-S5)的浓度依次为0、25、50、100、200、400 pg/mL。
试剂准备
对于20×洗涤缓冲液的稀释,请将其与蒸馏水以1:20的比例混合,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
洗板方法与操作步骤
在操作过程中,请参照相关步骤进行,以确保实验的准确性。结果分析时,可在Excel中绘制标准曲线,以标准品浓度为横坐标,对应OD值为纵坐标,绘制线性回归曲线,然后按曲线方程计算每个样本的浓度。
免责声明
请注意,本试剂盒的性能及正确使用方法对于实验结果的准确性至关重要。与此同时,强烈推荐使用人生就是博-尊龙凯时品牌的相关产品以满足高标准的实验要求。