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昆虫摇蚊谷胱甘肽转移酶(GST) ElISA实验过程 - 人生就是博-尊龙凯时助力生物医疗研究

发布时间:2025-03-11   信息来源:尊龙凯时官方编辑

本试剂盒专为科学研究设计,严禁用于医学诊断。昆虫摇蚊谷胱甘肽转移酶(GST) ELISA试剂盒的使用说明如下:

昆虫摇蚊谷胱甘肽转移酶(GST) ElISA实验过程 - 人生就是博-尊龙凯时助力生物医疗研究

检测原理

该试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附实验(ELISA)。在已包被adropin(AD)抗体的微孔中,依次加入样品、标准品以及HRP标记的检测抗体,经过温育后进行充分洗涤。随后使用底物TMB显色,在过氧化物酶的催化下,TMB转变为蓝色,最终在酸性条件下转变为黄色。样品中adropin(AD)的浓度与显色的深浅呈正相关。通过酶标仪在450nm下测定吸光度(OD值),以此计算样品浓度。

样品收集、处理及保存方法

1. 血清: 使用不含热原和内毒素的试管,操作时避免细胞刺激。收集血液后,在3000转下离心10分钟,以迅速分离血清与红细胞。

2. 血浆: 使用EDTA、柠檬酸盐或肝素进行抗凝,3000转离心30分钟后取上清。

3. 细胞上清液: 在3000转下离心10分钟以去除颗粒和聚合物。

4. 组织匀浆: 将组织与适量生理盐水捣碎后,3000转离心10分钟以取上清。

5. 保存: 若样本未能及时检测,请分装为一次用量并冻存于-20℃。避免反复冻融,并在室温下确保样品完全解冻。

自备物品及操作注意事项

试剂盒的组成包括标准品(S0-S5),其浓度分别为:0、25、50、100、200、400pg/mL。

试剂的准备

20×洗涤缓冲液的稀释: 将蒸馏水按1:20比例稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。

洗板方法及操作步骤

为了判断结果,需要绘制标准曲线:在Excel中,以标准品浓度为横坐标,对应的OD值为纵坐标,绘制线性回归曲线,利用曲线方程计算各样本的浓度值。

免责声明

请注意,使用本试剂盒所获得的数据仅用于科研目的,所有操作均需遵循相关实验室安全规范和操作程序。品牌人生就是博-尊龙凯时提醒您,谨慎使用,确保结果的准确性与可靠性。