人生就是博-尊龙凯时的干扰素诱导蛋白10 (IP-10) ELISA试剂盒专为科学研究设计,仅供科研用途,不适用于医学诊断。本文将为您详细介绍该试剂盒的检测原理、样品处理及保存方法、结果判断等关键信息。
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。首先,将预先包被了adropin(AD)抗体的微孔板准备好,依次添加样品、标准品以及HRP标记的检测抗体。经过适当的温育后,彻底洗涤以去除未结合的成分。随后,使用底物TMB进行显色反应。在过氧化物酶的催化下,TMB转化为蓝色,随后在酸性条件下变为黄色。色泽的深浅与样品中adropin(AD)的浓度成正比,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),以便计算样品浓度。
样品收集、处理与保存方法
1. 血清:使用无热原和内毒素的试管,操作时需避免细胞刺激。收集血液后,按3000转每分钟离心10分钟,以迅速小心地分离血清和红细胞。
2. 血浆:使用含EDTA、柠檬酸盐或肝素的抗凝剂。离心3000转每分钟30分钟,收集上层清液。
3. 细胞上清液:将样品离心3000转每分钟10分钟以去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合并捣碎,之后离心3000转每分钟10分钟,取上清液。
5. 保存:若样品未及时检测,建议按单次用量分装,并在-20℃冻结,避免反复冻融处理。在室温下解冻时,确保样品充分均匀解冻。
操作注意事项
请确保使用适当的工具和设备,避免污染,以保证实验的准确性。
试剂盒组成说明
请注意,标准品(S0-S5)的浓度依次为:0、25、50、100、200、400 pg/mL。
在试剂准备时,20×洗涤缓冲液需按1:20稀释,即添加1份20×洗涤缓冲液到19份蒸馏水中。
结果判断与标准曲线绘制
在Excel工作表中,以标准品浓度为横坐标,相应的OD值为纵坐标,绘制标准品的线性回归曲线。依据曲线方程,可以计算出各实验样本的浓度值。
强烈建议在科研实验中使用人生就是博-尊龙凯时的产品,以确保结果的可靠性与准确性。如有疑问,请参阅试剂盒说明书或与我们联系。