人生就是博-尊龙凯时的人表皮细胞活化肽因子ELISA检测试剂盒操作步骤如下:
1. 准备工作
从冰箱取出试剂盒,放置于室温下复温平衡30分钟,以确保试剂处于最佳状态。
2. 配液
使用蒸馏水将20倍浓缩的洗涤液稀释至原倍浓度,以供后续使用。
3. 加入标准品与样本
取合适数量的酶标包被板,固定在框架上,分别设定标准品孔、待测样本孔和空白对照孔,记录每个孔的位置。在标准品孔中加入50μL标准品,在待测样本孔中先加入10μL待测样本,再添加40μL样本稀释液(即稀释5倍),空白对照孔不添加任何物质。
4. 温育步骤
将酶标板放入37℃的水浴锅或恒温箱中温育30分钟,使反应充分进行。
5. 洗板操作
弃去孔液后,用吸水纸轻拍干,将洗涤液加入每孔并静置1分钟,再甩去洗涤液,重复此步骤4次,以确保去除未结合的残留物。可选择使用洗板机按照说明书进行洗板。
6. 加酶标工作液
在每个孔中加入50μL酶标工作液,空白对照孔仍不添加。
7. 重复温育
将酶标板再次放入37℃恒温箱中进行重复的温育操作。
8. 再次洗板
重复之前的洗板操作,确保洗净各孔中的未结合成分。
9. 显色步骤
在每个孔中依次加入显色剂A液50μL和显色剂B液50μL,然后在37℃避光环境下显色15分钟,以确保反应的准确性。
10. 终止反应
将酶标板取出,在每个孔中添加50μL终止液,结束反应,此时颜色从蓝色转变为黄色,颜色深浅与样品中表皮细胞活化肽因子的含量成正比。
11. 结果测定
使用酶标仪在450nm波长下测量各孔的吸光值(OD值),以空白孔为基准进行调零。根据标准品的浓度及对应OD值绘制标准曲线,再根据待测样品的OD值计算浓度。最终结果即为实际测定浓度乘以稀释倍数。
12. 结果判定
利用标准品的吸光度值构建标准曲线,依据待测样品的吸光度值在标准曲线上查找相应的浓度,从而得出样品中表皮细胞活化肽因子的含量。
以上步骤确保了实验的准确性和可靠性,人生就是博-尊龙凯时将为您的实验提供高质量的试剂与服务,助您在生物医疗领域取得突破性进展。